對(dui)于不同的目的，應采(cai)用不同的檢測方(fang)法。用染(ran)料和(he)生物大(da)分(fen)子結合(he)形成有(you)色的復合(he)物是電(dian)泳后檢測最(zui)常用的方(fang)法。

聚丙烯酰胺凝膠電(dian)泳結果不(bu)正(zheng)常現象和對策(ce)

1、指示劑前(qian)沿(yan)呈(cheng)現(xian)(xian)(xian)兩(liang)邊向(xiang)(xiang)(xiang)上或(huo)向(xiang)(xiang)(xiang)下的(de)現(xian)(xian)(xian)象。向(xiang)(xiang)(xiang)上的(de)“微笑”現(xian)(xian)(xian)象說明凝(ning)膠的(de)不(bu)均勻冷(leng)卻，中(zhong)(zhong)間部分冷(leng)卻不(bu)好，所(suo)(suo)以(yi)導致凝(ning)膠中(zhong)(zhong)分子(zi)有(you)不(bu)同(tong)的(de)遷移率所(suo)(suo)致。這種情況在(zai)用(yong)較厚的(de)凝(ning)膠以(yi)及垂直電(dian)泳中(zhong)(zhong)時(shi)(shi)常發生(sheng)。向(xiang)(xiang)(xiang)下的(de)“皺(zhou)眉”現(xian)(xian)(xian)象常常是由于(yu)垂直電(dian)泳時(shi)(shi)電(dian)泳槽(cao)的(de)裝置不(bu)合適引起(qi)的(de)，特別是當凝(ning)膠和玻璃板組成的(de)“三(san)明治”底(di)部有(you)氣泡或(huo)靠近隔(ge)片的(de)凝(ning)膠聚合不(bu)完全便會產(chan)生(sheng)這種現(xian)(xian)(xian)象。

2、“拖尾”現象(xiang)是(shi)電泳中(zhong)最常(chang)見的(de)(de)現象(xiang)。這常(chang)常(chang)是(shi)由于樣品溶解不佳(jia)引起的(de)(de)，克服的(de)(de)辦法是(shi)在加(jia)樣前離心，選用合(he)適的(de)(de)樣品緩(huan)沖(chong)液和凝膠緩(huan)沖(chong)液，加(jia)增溶輔助(zhu)試(shi)劑(ji)。另一方法是(shi)降低凝膠濃度。

3、“紋理”現象常(chang)常(chang)是(shi)由于樣品中不溶顆粒引起的(de)，克服辦(ban)法是(shi)增(zeng)加溶解(jie)度和離心(xin)除(chu)去不溶性顆粒。

4、蛋白帶偏(pian)(pian)斜(xie)常(chang)常(chang)是由于(yu)濾紙條(tiao)或電極放置不平行(xing)所引起的，或由于(yu)加樣位置偏(pian)(pian)斜(xie)而引起。

5、蛋(dan)白(bai)帶過寬，與鄰近蛋(dan)白(bai)泳(yong)道的蛋(dan)白(bai)帶相連，這是由于加樣量太多或加樣孔泄漏引起(qi)的。

6、蛋(dan)(dan)(dan)白帶(dai)模糊不(bu)(bu)清和分(fen)辨(bian)不(bu)(bu)佳是由于多(duo)種(zhong)原因引起的(de)(de)。雖然梯度(du)凝(ning)膠可(ke)以(yi)(yi)提高分(fen)辨(bian)率，但與其(qi)他方法相(xiang)比，常(chang)規聚丙烯酰胺凝(ning)膠電(dian)泳(yong)(yong)是分(fen)辨(bian)率較低的(de)(de)方法。為(wei)了提高分(fen)辨(bian)率，不(bu)(bu)要加過多(duo)的(de)(de)樣(yang)品(pin)(pin)，小體積樣(yang)品(pin)(pin)可(ke)給出(chu)窄帶(dai)。加樣(yang)后應(ying)立即(ji)電(dian)泳(yong)(yong)，以(yi)(yi)防止擴(kuo)散(san)。選擇合適的(de)(de)凝(ning)膠濃度(du)，使(shi)組(zu)分(fen)得以(yi)(yi)充分(fen)的(de)(de)分(fen)離。通常(chang)靠近(jin)前沿的(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白帶(dai)分(fen)辨(bian)率不(bu)(bu)佳，所以(yi)(yi)應(ying)根(gen)據(ju)分(fen)子量與凝(ning)膠孔徑的(de)(de)關系，灌制足夠長度(du)的(de)(de)凝(ning)膠，以(yi)(yi)使(shi)樣(yang)品(pin)(pin)不(bu)(bu)會走出(chu)前沿。樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白水(shui)解(jie)(jie)作用(yong)也(ye)引起擴(kuo)散(san)而(er)使(shi)分(fen)辨(bian)率降(jiang)低。水(shui)解(jie)(jie)作用(yong)通常(chang)發生在樣(yang)品(pin)(pin)準備的(de)(de)時候，系統中的(de)(de)內(nei)源(yuan)性蛋(dan)(dan)(dan)白酶(mei)會水(shui)解(jie)(jie)樣(yang)品(pin)(pin)蛋(dan)(dan)(dan)白，如果在緩沖液(ye)中加蛋(dan)(dan)(dan)白酶(mei)抑制劑可(ke)以(yi)(yi)減少這種(zhong)情況的(de)(de)發生。